ТрихоСлайд (2х30)
ТрихоСлайд для выявления АГ Trichomonas vaginalis.
Набор имеет регистрационные удостоверение- ФСР 2012/13294, НДС 10% включен в стоимость
ТрихоСлайд™
Инструкция по применению антител диагностических ТрихоСлайд™ для выявления антигенов Trichomonas vaginalis методом непрямой иммунофлюоресценции (РнИФ), сухих
Влагалищная трихомонада может быть грушевидной, амебовидной или округлой формы размером от 8-11 до 18-20 мкм, имеет шипик, ундулирующую мембрану и фибриллы. В передней трети трихомонады располагаются овальное ядро с ядрышком, 4 жгутика; аксостиль (осевой стержень) выступает в заднем конце в виде шипика.
Основными очагами обитания трихомонад у мужчин является мочеиспускательный канал (иногда предстательная железа, семенные пузырьки, придатки яичек, мочевой пузырь, бульбарно-уретральные железы). У женщин - влагалище и уретра (иногда - вестибулярные железы, ходы Скене, канал шейки матки, мочевой пузырь).
Подготовка материала для исследования
Забор биоматериала производят при многочасовой задержке мочи (4-6 часов). Перед лабораторным исследованием больные не должны принимать противотрихомонадные препараты в течение 7-10 дней.
У женщин забор биоматериала производят со слизистых уретры, шейки матки и заднего свода влагалища (после удаления выделений). У мужчин - со слизистой уретры.
Для получения биоматериала со слизистых оболочек используется одноразовый зонд, имеющий ватный тампон с повышенной адсорбцией, или пластиковый зонд с синтетическим ворсом.
Материал собирают вращательным движением зонда. Непосредственно после взятия материала готовят мазок-отпечаток, касаясь поверхности лунки предметного стекла.
Предметное стекло заранее маркируют, указывая Ф.И.О. больного и дату взятия пробы. Приготовленный мазок высушивают на воздухе, фиксируют 96 %-ным этанолом в течение 5 мин. или наносят на мазок 2-3 капли ацетона до полного его испарения. Стекло с фиксированным мазком может храниться при температуре +2-8 °С в течение 10 суток.
Постановка РнИФ
Вскрывают флакон препарата «ТрихоСлайд» с антителами трихомонадными (флакон №1) и флакон с ФИТЦ-меченными антителами (флакон №2). Добавляют по 1 мл дистиллированной воды в каждый флакон и растворяют содержимое в течение 1-2 мин. при комнатной температуре, слегка встряхивая флаконы. Растворенные реагенты можно хранить в темноте при температуре +2...+8 °С в течение 10 суток. Замораживание растворенных реагентов не допускается.
1. На мазок микропипеткой наносят 30 мкл раствора из флакона №1. Стекло помещают во влажную камеру и выдерживают при комнатной температуре или в термостате при 37 °С в течение 15 мин.
2. Стекло промывают в проточной водопроводной воде 2 мин.,ополаскивают дистиллированной водой и высушивают на воздухе.
3. На мазок микропипеткой наносят 30 мкл раствора из флакона №2. Стекло помещают во влажную камеру и выдерживают при комнатной температуре или в термостате при 37 °С в течение 15 мин.
4. Стекло промывают, как описано в п. 2.
5. На высушенный мазок наносят каплю монтирующей жидкости, накрывают покровным стеклом и микроскопируют в люминесцентном микроскопе или с использованием люминесцентной насадки к обычному оптическому микроскопу.
Рекомендуется использовать масляную иммерсию с объективом МИ 90х и окулярами 4-7х или водно-иммерсионную систему с объективами ВИ 60-70х и окулярами 5-10х.
Используют микроскоп с фильтрами, обеспечивающими возбуждающий свет с длиной волны не более 490 нм и эмиссию с длиной волны 520 нм.
Порядок расположения фильтров (от лампы):
1.БС-8-3 2.СЗС-24-4 3.ФС-1-4
Учет результатов
Трихомонады выявляются в виде полиморфных мембраноограниченных структур, имеющих ярко-зеленое свечение. У подвижных форм могут прокрашиваться жгутики. Неспецифическая бактериальная микрофлора окрашивается в оранжевый цвет; клетки эпителия, лейкоциты и сперматозоиды - в оранжевый и красно-бурый цвет. Допускается неспецифическое диффузное слабо-зеленое свечение цитоплазмы эпителиальных клеток, слизи и посторонней микрофлоры.
Результат считается отрицательным, если в мазке отсутствует специфическое свечение при обязательном наличии не менее 10 клеточных элементов.
Срок годности набора 1 год с даты изготовления.
1. Антитела (1) трихомонадные, сухие, 1 мл – 2 фл.
2. Антитела (2) ФИТЦ-меченные, сухие, 1 мл – 2 фл.
3. Жидкость монтирующая, 1 мл – 1 фл.
4. Ложемент-штатив.
5. Инструкция по применению.